Número de Código: E.C.3.2.1.1
Sinonimia: alfa amilasa, 1,4-alfa-glucan -glucan-hidrolasa.
Método:
Existen en el mercado una cantidad importante de métodos para la determinación en líquidos biológicos de alfa-amilasa. Los más utilizados o difundidos a nivel de laboratorios de baja complejidad son los espectrofotométricos a 405 nm, difiriendo entre ellos por la variabilidad de sustratos utilizados. Se fundamentan en la medida cinética de la liberación de un cromógeno amarillo por acción de la alfa amilasa sobre los distintos tipos de sustratos como por ejemplo:
2-cloro-4-nitrofenil-alfa-D-maltotriosido; 6-benzyl-4-nitrofenil-alfa-maltopentaosido; 2-cloro-4-nitrofenil-beta-maltoheptaosido; 4,6-bencilideno-4-nitrofenil-alfa-maltoheptaosido; 5,6-etilideno-4-nitrofenil-alfa-maltoheptaosido; 4-nitrofenil-alfa-maltoheptosido
Muestra:
Suero o plasma obtenido con heparina.
EDTA y quelantes del calcio no deben ser usados.
Líquidos pleurales, ascitis, secreciones de drenajes, lavajes peritoneales.
Orina espontánea, de 12 horas o de 24 horas.
Estabilidad:
Suero una semana a 4-8°C o un año a - 28°C. Orina: un día a 4°C, no congelar.
Valores de referencia (en U/L)
Indicador de la reacción y sustrato | Temp.°C | Suero | Orina | |
NADH | Maltotreosa (G4), maltofosforilasa | 25 | 6-34 | 24-154 |
ß-fosfoglucomutasa, glucosa 6 fosfatodehidrogenasa, NAD | 37 | 25-125 | ||
2-Cloro-4- nitrofenol | 2-Cl-4-nitrofenil--D maltotriósido | 25 | 23-130 | <600 |
(CNP-G3) | 37 | 69-210 | <1.050 | |
2-Cloro- nitrofenol | 2-Cl-4-nitrofenil-ß-D-maltoheptaosido | 30 | <67 | <369 |
(CNPbG7), -glucosidasa, bglucosidasa | 37 | <86 | <470 | |
2-Cloro-4 nitrofenol | 3-cetobutilideno(G5)-2-Cl-4-nitrofenil | 25 | no eportado | |
nitrofenol (G1)-ß-D-maltopentaosido(KB-CNP-G5), | 37 | 45-136 | ||
-glucosidasa, ß-glucosidasa(inh.germen tri | 37 | 21-61 *. | ||
4-nitrofenol | 6-bencil (G5)-4-nitrofrenil (G1)--D-malto | 25 | 17-56 | <190 |
pentaosido (BzG5), -glucosidasa, glucoamilas | 37 | 42-116 | <380 | |
4-nitrofenol | p-nitrofenil (G1)--D-maltoheptaosido | 25 | 28-141 | <600 |
(pNP-G7), -glucosidasa | 37 | 46-244 | <1000 | |
(ant. monoclonal contra | 25 | 8-65 * | <450 | |
amilasa salival) | 37 | 17-115* | <800 | |
4-nitrofenol | 4-6-etildeno (G7)-p-nitrofenil (G1),-D malto | 25 | 23-120 | <753 |
heptaosido (EPS-G7),-glucosidasa | 37 | 70-220 | <1240 | |
(2 antic. monoclonales | 25 | 8-65* | ||
contra amilasa salival)* 3 | 7 | 17-115* | ||
4-nitrofenol | 4-6-bencildeno(G7)-p-nitrofenil(G1) -D malto | 25 | <40 | |
heptaosido,(Bzn-G7 )-glucosidasa, glucoamilasa | 37 | <82 |
* Determina amilasa pancreática (solo la isoenzima P)
Significado clínico:
La mayor actividad se encuentra en glándulas parótidas y en páncreas.
La amilasa pancreática diferencia entre pancreatitis aguda y crónica. El 80% de pacientes con pancreatitis aguda (sensibilidad clínica 81-88%) manifiestan valores aumentados de amilasa pancreática en las primeras 24 horas, pero no proporcionalmente a la gravedad de la enfermedad. Se normaliza a las 48 horas o a los 4-6 días como máximo. En este caso, también se ve aumentada la excreción urinaria de la enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 días, luego de que la actividad sérica ha alcanzado los niveles normales.
Los valores aumentados que persisten durante más tiempo, sugieren una necrosis persistente o la posible formación de pseudoquistes.
En pacientes hiperlipémicos con pancreatitis, frecuentemente se observan niveles de amilasa sérica y urinaria normales.
Utilidad clínica:
Alfa amilasa en otros fluidos biológicos
Se utiliza en drenajes postoperatorios para evaluar la posibilidad de fístulas pancreáticas o en secreciones de heridas. En las pleuritis basales (debido a pancreatitis) predomina la fracción pancreática mientras que la salival se encuentra en pacientes con leucemia, carcinoma bronquial, y metástasis pulmonares.
Variables preanalíticas:
Aumentado:
Alcohólicos. Por contaminación de la muestra con saliva.
Variables por enfermedad:
Aumentado:
En parotiditis, obstrucción intestinal, embarazo ectópico, salpingitis, peritonitis, quiste y pseudoquiste pancreático, úlcera gástrica, pancreatitis crónica, hipertiroidismo, carcinoma de cabeza de páncreas, cetoacidosis diabética, alcoholismo, hepatopatías (hepatitis viral, cirrosis, carcinoma primitivo y metástasis hepáticas).
Aumentos ocasionales sin compromiso pancreático pueden encontrarse en bulimia y anorexia, cirugías cardiovasculares, enfermedad inflamatoria del intestino, en estos casos predomina la isoenzima salival.
Macroamilasemia: las macroamilasas son macroenzimas, es decir, complejos macromleculares de alfa amilasa ligada a la región Fab de las inmunoglobulinas (principalmente IgA) que están impedidas por tener un mayor tamaño de filtrar por glomérulos. Esto motiva un aumento hasta cuatro veces el valor por su vida media más prolongada. Es típico la hiperactividad sin compromiso pancreático, escasa actividad en orina con función renal normal, y actividad de lipasa normal.
Disminuido:
Hepatopatías graves.
Hipoamilasemia debido a una baja concentración de amilasa salival, ha sido encontrada en individuos obesos.
Hipoamilasemia familiar (genético) que no indica una hipofunción pancreática.
Variables por drogas:
Aumentado:
Opiáceos.
Disminuido:
Somatostatina.
Bibliografía:
1. LotharT. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and assessment of clinical laboratory results, English edition, 1998.
2. Jacobs D.S., Demott W.R. Grady H. et al., Laboratory Test Handbook, Edit by Lexi-Comp Inc., Cleveland, United States of America, 4th edition, 1996.
3. Young D. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Test . AACC, second edition, 1997
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5. Young D. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Test, AACC, third edition, 1990.